亚洲成AV人片在线观看天堂无码_99久久无码一区人妻a黑_国内揄拍国内精品少妇国语_精品久久8X国产免费观看

品名：Himedia維生素B12測定培養基

英文：Vitamin B12 Assay Medium

貨號：M036

品牌：HiMedia

用途：維生素B12的(de)微生物法測定

原理　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

乳酸桿菌生(sheng)長需要特別的營(ying)養(yang)，因而在非(fei)選擇性(xing)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)上很難生(sheng)長。維(wei)生(sheng)素測定用培(pei)養(yang)基(ji)(ji)用于維(wei)生(sheng)素的微生(sheng)物法(fa)測定。該方法(fa)需要三種培(pei)養(yang)基(ji)(ji)：即維(wei)持培(pei)養(yang)基(ji)(ji)，用于保(bao)持菌種活(huo)力；接(jie)種培(pei)養(yang)基(ji)(ji)，用于測試(shi)菌液的制備；測定用培(pei)養(yang)基(ji)(ji)，用于待測維(wei)生(sheng)素的定量。

HiMedia維生素B12測定培養基，不含維生(sheng)素B12，但包含所有其他維(wei)生(sheng)素(su)和必要養分，用于萊士曼(man)乳酸桿(gan)菌（ATCC 7830）的生(sheng)長。萊士曼(man)乳酸桿(gan)菌（ATCC7830）作(zuo)為測定用菌，最早由Capp等人(ren)描述（1）并(bing)被美(mei)(mei)國藥典和美(mei)(mei)國分析化學家協會(hui)（AOAC）所推薦（2，3）。

用(yong)已知稀釋度的維生素B12標(biao)準品，可以制備標(biao)準曲線（2，3）。

測試菌液的(de)制(zhi)備是將將活化后的(de)菌株(zhu)接(jie)種到乳(ru)酸(suan)桿菌肉湯培養基中，推薦在37°C 孵育24 小(xiao)時，再(zai)離(li)心、清洗、重懸于10 ml 生(sheng)理鹽水中，再(zai)通過(guo)濁度(du)分(fen)析或酸度(du)分(fen)析，確定(ding)生(sheng)長反應(ying)。用維生(sheng)素B12的(de)(de)濃度(du)及對應(ying)的(de)(de)吸光度(du)制(zhi)作標(biao)準(zhun)曲線。用標(biao)準(zhun)曲線可確定(ding)待測樣本中的(de)(de)維生(sheng)素B12的(de)(de)濃度(du)。

應(ying)非(fei)常小心地避免培養基和玻(bo)璃器具(ju)的(de)污染。應(ying)使用(yong)潔凈的(de)無去污劑(ji)的(de)玻(bo)璃器具(ju)。少量的(de)外源物質(zhi)的(de)污染可能導致(zhi)錯誤的(de)結果。用(yong)于接(jie)種(zhong)的(de)測定菌應(ying)在專用(yong)的(de)培養基中培養。

應用(yong)　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　　 　　　 　

HiMedia維生素B12測(ce)定培養基推薦采用萊士曼氏乳(ru)酸桿(gan)菌（ATCC 7830）作為測定(ding)用(yong)菌(jun)，進行維生(sheng)素(su)B12的(de)微生(sheng)物(wu)法測定(ding)。

質量(liang)控制　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　  　

?   外觀——奶油色(se)至黃色(se)，具均勻性，傾向形(xing)成可容易分(fen)解成粉末狀的軟塊

?   制備好的培養基顏色和透明度——淡琥珀色透明溶液，可能有輕微沉淀

?   配比濃度(du)——在(zai)25°C下8.5%w/v(8.5g/100ml水）水溶(rong)液，pH值為6.1±0.2

?   pH值(zhi)——5.90-6.30

配置(zhi)　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

稱取8.45g干粉培(pei)養(yang)基(ji)溶(rong)(rong)于100ml蒸(zheng)餾(liu)(liu)水，必(bi)要時加(jia)(jia)熱使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)溶(rong)(rong)解(jie)。混勻，使(shi)輕微的(de)沉(chen)淀均勻分布。測(ce)定時，分裝試管(guan)(guan)，每管(guan)(guan)為(wei)5ml培(pei)養(yang)基(ji)（包含標準(zhun)品(pin)和待測(ce)樣品(pin)）。加(jia)(jia)蒸(zheng)餾(liu)(liu)水，使(shi)總體(ti)積達到10ml。高(gao)壓(ya)消(xiao)毒(du)15磅121°C 5分鐘。立即冷卻培(pei)養(yang)基(ji)。每個(ge)試管(guan)(guan)(10 ml)的(de)維生素B12水平為(wei)0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng時，均可獲得滿意(yi)結果。

培養(yang)反(fan)應　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

進行微(wei)生物法(fa)測(ce)定維生素B12。采用(yong)萊士曼氏(shi)乳(ru)酸(suan)桿菌（ATCC7830），35-37°C孵(fu)育18-24小時。

生長狀況(kuang)　　　　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　

隨(sui)著測定管(guan)標(biao)準品水平升(sheng)高(gao)，（美國(guo)藥典維生素B12標準水(shui)平(ping)，0，0.025，0.050，0.075，0.1，0.125，0.150，0.2ng)，目(mu)標菌生長(chang)逐漸遞增(zeng)，伴(ban)隨著620nm處吸光度的增(zeng)加。