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葡萄糖醛酸(suan)酶陽性大腸桿(gan)菌(TBX)顯(xian)色培(pei)養基(ji)
法(fa)國科(ke)瑪嘉TBX顯色培養基
用于:葡萄糖醛酸酶(mei)陽性大(da)腸桿(gan)菌的檢測和計(ji)數
組 分(fen)
瓊脂 15.0 g/L 酪蛋白胨20.0g/L 膽汁酸鹽 1.5g/L
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡(pu)糖苷酸(suan)144umol/L
pH值 7.2
操作
1、取(qu)瓶內法國科瑪嘉(jia)TBX顯色培養(yang)基(ji)干粉36.6g溶于(yu)1000mL去離(li)子(zi)水(shui)的(de)潔凈三角瓶中,充分攪拌(ban)混(hun)勻。也可根據需要(yao)按照36.6 g/L的(de)比例擴大或縮(suo)小制備培(pei)養基的(de)量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使(shi)其*溶解(jie)。若使(shi)用微波爐加(jia)熱,應將(jiang)培養基加(jia)熱沸騰,立即移出,輕(qing)輕(qing)搖勻,再放入微波爐加(jia)熱,觀(guan)察小氣(qi)泡(pao)變為(wei)大氣(qi)泡(pao),直至*溶解(jie)即可。切勿使(shi)培養基溢出。常規高壓(121℃,15min)。
3、加熱(re)后(hou)的培養基冷卻至45℃~50℃的培(pei)養(yang)基,輕輕地(di)搖動均勻,傾(qing)注平皿,使其凝(ning)固,晾干備用(yong)。
保存 該(gai)成品平板(ban)在(zai)室溫可(ke)保存一天或在(zai)冰箱(xiang)內貯存2個(ge)月(2℃~8℃,避(bi)光)。
接種
傾(qing)注培養(yang)法接種:接種1ml樣品(pin)于直徑為(wei)90mm的培養(yang)皿中,然后傾(qing)注15ml上述冷卻到45℃的培養(yang)基中,混勻使其凝固。先在(zai)36±1℃倒(dao)置(zhi)培養基4h,然后(hou)轉(zhuan)移至(zhi)44℃恒溫需氧培養(yang)基14h-20h。
表面接種發(fa):劃(hua)線或(huo)涂布接種(冰(bing)箱內保存的(de)平板使用前應恢復至室溫(wen)),先在(zai)36±1℃倒置培養基4h,然后轉移至44℃恒溫需氧培(pei)養基14h-20h。
結果
微生物(Microorganism) | 菌落顏(yan)色 |
大(da)腸桿菌 | 藍色 |
其他革(ge)蘭氏陰性菌 | 無色 |
其(qi)他(ta)革蘭氏陽性菌 | 抑制 |
性能(neng)及局限
對大(da)腸桿菌敏感(gan)度(du)為97%。對葡萄糖醛酸酶(mei)陰(yin)性大腸桿(gan)菌(如大腸桿(gan)菌O157出現假陰(yin)性結果,如果主要研究病原菌如大腸(chang)桿(gan)菌O157,可選用科瑪(ma)嘉O157顯(xian)色培(pei)養基。
貯存條件
干(gan)粉需保存于15℃~30℃干燥環(huan)境(jing)中,在有效(xiao)期前使用。
污染處(chu)理
使(shi)用過的培養基(ji)需(xu)要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按(an)照有關規定丟棄。
附:供體(ti)外診斷(duan)使(shi)用,產品須專業人員操作。